简述ELISA技术操作程序?
简述ELISA技术操作程序?
正确答案:以间接法为例。(1)抗原包被:用缓冲液将抗原稀释成最适宜浓度,然后加在聚苯乙烯板孔中,每孔200nl,4℃过夜。(2)洗涤:倾去孔内抗原溶液,再用洗涤液加满各孔,室温放置3分钟,倒掉,如此重复3次。(3)加待检血清:将待检血清作适当稀释,加入孔中,每孔200nl,各设一孔阳性血清和阴性血清对照,37℃孵育2小时。(4)洗涤同第2条。(5)加酶标记抗体,每孔200nl,37℃孵2小时。(6)洗涤同第2条。(7)加底物:每孔加入200nl新鲜配制的底物溶物37℃,反应15-30分钟。(8)终止反应:每加2MH2SO450微升。(9)结果判定。