关于ABC法正确的是（）

关于ABC法正确的是（）
A、制备酶标生物素
B、亲合素和HRP-B的浓度比不应高于4∶1
C、反应时，游离亲合素作为关键的桥联剂
D、先按比例将酶标生物素与亲合素混合成复合物，然后直接使用
E、需制备生物素化的抗体
正确答案：ABDE