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生物化学实验

101本次凝胶层析中使用的介质是SephacrylS-200HR，其分离范围是（）
102凝胶层析中某一溶质在凝胶内部和外部的分配系数，也就是Kd值，与下面哪个因素有关（）
103在实际工作中，我们通常使用Kav，也就是有效分配系数来代替Kd。计算Kav的话，需要测定出哪些参数（）
104影响凝胶层析柱选择性的因素有（）
105凝胶层析中，比凝胶孔径大的分子最先被洗脱出来。
106对于某一型号的凝胶，在一定的分子量范围内，各个组分的Kav与其分子量的对数成非线性关系。
107实际工作中，我们经常使用操作压来装柱和平衡。操作压是指层析柱内液面与出水口的高度差，或者是贮液器内液面与出水口的高度差。
108凝胶层析柱中有肉眼可见的小气泡，对分离效果影响不大。
109外源蛋白可以通过下列哪种途径表达（）
110T7表达体系里面包括什么（）
111如果蛋白在37°C下无法可溶表达，可以从采取如下步骤（）
112LB培养基成分包括什么（）
113培养过夜的菌液扩大培养后，等OD600到达如下什么值时比较适合诱导（）
114从肝脏中直接提取的蛋白其来源属于天然来源。
115使用IPTG诱导外源基因表达时，应该预先筛选IPTG浓度。
116使用T7表达系统的原因是因为T7RNA聚合酶保真性好。
117在T7表达系统中，T7RNA聚合物本身的表达无需诱导。
118如果蛋白无法可溶表达，有时候可以加上一个标签使它以融合蛋白的形式表达可以得到可溶的表达产物。
119细胞破碎的正确方法包括（）
120下面哪种层析技术中蛋白是先被吸附到了介质上（）
121下面哪种层析方法不会稀释产物（）
122下面哪种方法是常用浓缩蛋白的方法（）
123在pH70的缓冲条件下，下面哪种等电点的蛋白可以用阴离子交换树脂分离纯化（）
124蛋白的哪种特性可以用来粗纯化（）
125蛋白哪种性质可以用来设计层析实验对其进行纯化（）
126如果蛋白可以利用亲和层析分离纯化，那么通常会首先考虑亲和层析。
127设计纯化实验时，尽量不要利用相似原理的纯化步骤进行多步纯化。
128在超声破碎时，可以连续超声5分钟，这样可以快速完成细胞破碎。
129下面哪些是我们需要评估的指标（）
130我们进行了如下提纯，纯化步骤顺序为从A到D，每步我们都列出了其产物所测到的比活力（单位为Umg-1）。那么哪几步纯化是有效的（）
131下面哪种方法能够评估蛋白的样品均一性（）
132下面哪种方法不能够评估蛋白的纯度（）
133如果有一个蛋白A，其分子量为40KD。它在NativePAGE上产生两条条带，下面哪种说法有可能具有合理性（）
134纯化蛋白时不一定是越多的纯化步骤效果就越好。
135如果在SDS-PAGE上看到一条条带，我们可以断定该蛋白的纯度已经达到100%。
136通过SDS-PAGE我们可以判断蛋白单体的分子量。
137NativePAGE不能用于判定蛋白的分子量。
138通过NativePAGE我们可以判定蛋白为几聚体。
139下面哪一物质是蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所不需要的。
140SDS处理后蛋白在胶上的迁移率主要受何种因素影响。
141一个100KD的蛋白适合有T值为哪个的聚丙烯酰胺凝胶来分离。
142聚丙烯酰胺凝胶电泳四甲基乙二胺TEMED的作用是（）
143聚丙烯酰胺凝胶电泳过硫酸铵APS的作用是（）
144SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白样品的迁移率与下列哪个因素有关（）
145对不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳说法不正确的是（）
146不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳不具有下列哪些作用（）
147蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳必须使用SDS，如果没有SDS处理电泳结果毫无意义。
148SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白的迁移率与其分子量成线性关系。
149根据稳态理论，酶促反应开始后，在一定时间内可保持不变的是什么？（这是推导米氏方程的重要前提）
150对于遵守米-曼氏动力学的酶来说，当底物浓度等于2Km时，酶促反应速率与Vmax之比为（）
151为测定kcat值，首先需要测定（）
152酶促反应的各动力学参数中，与酶浓度无关的是（）
153以下关于Km的描述中，正确的是（）
154测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时，需要注意的问题包括（）
155酶促反应过程中，每一时刻的瞬时速率都不一样。
156如果酶促反应在刚开始的一段时间内反应速率保持不变，则此段时间内的平均速率就能代表反应初速率。
157测定底物浓度对酶促反应速率的影响作用时，需要保持酶浓度不变。
158对于遵守米-曼氏动力学的酶来说，在双倒数图中，其动力学曲线与横轴的交点的数值为1/Km。
159碘-碘化钾溶液的作用是（）。
160关于本实验，以下说法正确的是（）。
161在进行样品总糖提取时，用浓HCl处理是为了将总糖彻底水解成单糖，而在测定前用NaOH中和至中性则是为了避免浓HCl改变3,5-二硝基水杨酸试剂的碱性环境，影响反应的进行。（）
162在样品中加入DNS试剂后，沸水浴的时间不需要严格控制。（）
163在3,5-二硝基水杨酸试剂中加入结晶酚是为了增强试剂的显色能力。（）
164在3,5-二硝基水杨酸试剂加入亚硫酸钠可以消除试剂中的溶解氧的影响，起稳定试剂的作用。（）
165用3,5-二硝基水杨酸定糖法测定还原糖含量时，使用的波长是（）nm。
166美拉德反应：即（）与氨基酸/蛋白质在加热时发生的一系列复杂反应，生成棕/黑色的大分子物质，同时还产生具有不同气味的中间体分子，包括还原酮、醛和杂环化合物，为食品提供诱人的风味和色泽。
167在还原糖标准曲线制作过程中，其中空白管中（）（填要或不要）加入DNS试剂。
168本实验中的索氏抽提法采用的是（）。
169下列物质中不能作为脂肪抽提溶剂的是（）。
170下列物质中哪些属于粗脂肪？（）
171本实验采用石油醚提取粗脂肪，如果温度不够，可以用酒精灯加热。（）
172抽提完毕，盛有粗脂肪样品的小烧瓶在103-105℃烘干30分钟，要避免过热。（）
173只有当浸提管内溶液液面的高度高于通气管高度时，浸提管内的溶液才能经虹吸管流入小烧瓶中。（）
174在开始浸提前，需要将装有样品的滤纸包放在（）内。
175索氏提取器为一回流装置，由小烧瓶、（）和冷凝管三者连接而成。
176回流提取粗脂肪时所使用的加热仪器为（）。
177蛋白质的平均含氮量是（）
178消化的最终产物是（）
179克氏催化剂包括（）
180蒸馏放出的气体是（）
181蒸馏释放的气体用什么吸收（）
182消化的过程很迅速。
183蒸馏时氢氧化钠是过量的。
184蒸馏阶段加样时不需要水封。
185蒸馏时硼酸瓶发生倒吸时要将酒精灯火力降低。
186第一滴蒸馏液从冷凝柱顶端滴下时起，继续蒸馏5分钟即可停止蒸馏。
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